Kas yra ELISA procedūra?

ELISA procedūra yra procedūra, naudojama atlikti su fermentais susietą imunosorbentinį matricą (ELISA), kuris gali būti naudojamas konkrečių baltymų buvimui nustatyti ir jų koncentracijai nustatyti. Iš tikrųjų yra daugybė skirtingų procedūrų, kurias galima naudoti atliekant ELISA testą, įskaitant tiesiogines, netiesiogines ir vadinamąsias „sumuštinių“ procedūras. Visais atvejais ELISA procedūra atliekama laboratorijoje kontroliuojamomis sąlygomis, kad būtų sumažinta klaidingų rezultatų rizika.

Norint atlikti ELISA testą, būtina turėti mėginį, pvz., kraujo. Dažna priežastis atlikti ELISA yra bandymas, ar nėra sąlyčio su infekciniu agentu. Tokiu atveju atitinkamas mėginys gali turėti arba neturėti specifinio baltymo, o tyrimas atliekamas ieškant to baltymo. Testas taip pat gali būti naudojamas norint patikrinti baltymų koncentraciją.

Bandymui atlikti dažnai naudojamas prietaisas, vadinamas mikrotitravimo plokštele. Medicininių ir kriminalinių dramų gerbėjai tikriausiai yra susipažinę su mikrotitravimo plokštelėmis; jie atrodo kaip maži padėklai su daugybe įdėklų, kurių kiekviename yra buteliukas. Atliekant sumuštinių ELISA procedūrą, technikas pirmiausia padengia buteliukus žinomu žinomos koncentracijos antigenu, o tada nuplauna buferiniu tirpalu. Tada pridedamas serumas, pagamintas iš paciento mėginio, plaunamo tame pačiame buferiniame tirpale.

Jei pacientas jau turi mėgintuvėliuose antikūnų prieš antigenus, jie prilips prie mėgintuvėlių šonų. Kitas ELISA procedūros žingsnis apima to paties antigeno, pažymėto fermentu, įvedimą į mėgintuvėlius. Antigenas užsifiksuoja prie antikūnų, kurie prilipo prie vamzdelių šonų. Fermentas fluorescuoja arba keičia spalvą, todėl technikas gali pamatyti, ar serume yra antikūnų, kurie užsifiksavo prieš antigenus, ir nustatyti koncentraciją pagal fermento reakcijos intensyvumą.

ELISA procedūra yra labai jautri ir itin tiksli. Technikai naudoja labai specifinius antigenus, kad įsitikintų, jog jie identifikuoja tinkamus antikūnus, arba atvirkščiai, priklausomai nuo atliekamo tyrimo. Tačiau pasitaiko klaidingų teigiamų rezultatų. Klaidingai teigiamo tyrimo pavyzdyje dažniausiai naudojamas ELISA tyrimas, siekiant patikrinti, ar nėra ŽIV poveikio, o kartais gaunamas klaidingas teigiamas rezultatas, nes tirpalas gali jungtis su baltymu, susijusiu su ŽIV, kurį kai kurie žmonės turi neužsikrėtę. Štai kodėl teigiamas rezultatas turi būti patvirtintas Western Blot.