Imunohistocheminis (IHC) antikūnas yra reagentas, dažnai naudojamas moksliniuose tyrimuose, norint pažymėti dominančius antigenus. Antigenas yra bet kokia maža molekulė, galinti sukelti imuninę reakciją, kuri priverčia gaminti antikūnus prieš tą vienintelį antigeną. Remiantis žinduolių imunine sistema, antikūnų gamyba yra vienas žingsnis procese, kai medžiaga identifikuojama kaip svetima, kad organizmas galėtų užpulti ir išstumti invazinę medžiagą, nesvarbu, ar tai virusas, bakterinė infekcija ar maža molekulė, pvz., žiedadulkės.
Antikūnai gali turėti didžiulį specifiškumą ir gebėjimą surišti antigenus. Šis specifiškumas išnaudojamas mokslininkų naudai, kai antikūnų gamyba yra nukreipta į specifinių dominančių antigenų identifikavimą. Ploną audinio dalį galima nudažyti antikūnu, kad eksperimentuotojas galėtų lengvai nustatyti visas tame mėginyje esančias antigeno vietas. Daugelis kompanijų specializuojasi antikūnų kūrime, todėl mokslininkams ir eksperimentuotojams yra prieinamas didžiulis kolektyvinis antikūnų katalogas.
IHC antikūnas naudojamas įvairiuose eksperimentiniuose metoduose. Antikūnų dažymas plonose audinio dalyse, įterptose į parafiną arba plastiką, dažnai naudojamas, kad antigenus būtų galima rasti vietoje. IHC antikūnas taip pat gali būti naudojamas eksperimentiniuose nusodinimo metoduose, tokiuose kaip bendro imunoprecipitacijos tyrimas, daugiausia dėmesio skiriant antigenų pašalinimui iš tirpalo, siekiant kiekybiškai įvertinti antigeno kiekį dideliame audinio gabale. Tyrimai, kuriais matuojamas šviesos kiekis, galintis prasiskverbti per audinių kultūros plokštelę po to, kai supernatantas buvo veikiamas gerai padengto IHC antikūno dugnu, taip pat dažnai naudojami kiekybiniam antigeno kiekiui homogenizuotame preparate nustatyti. audinių mėginys.
Galima turėti antikūnų dažymo protokolus, kurie pagrįsti vieno antikūno naudojimu antigenui aptikti. Šie protokolai paprastai naudojami audinių mėginiams, kurie yra įterpti į nereaguojantį substratą ir pritvirtinti ant stiklelio. Šios vieno antikūno dažymo procedūros taip pat populiarios laboratorijose, kurios žymi savo antikūnus aptikimo molekulėmis, tokiomis kaip fluoroforai.
Tačiau dažniau antikūnų dažymo protokolams reikia naudoti pirminius ir antrinius antikūnus. Pirminis IHC antikūnas sukuriamas prieš specifinį antigeną, kuris gali būti nedažnai tiriamas. Antrinis IHC antikūnas bus sukurtas prieš pirminį IHC antikūną. Tačiau antrinis antikūnas bus pažymėtas identifikuojančia molekule, tokia kaip biotinas arba fluoroforas. Šis dviejų antikūnų metodas yra įprastas, nes įmonės taupo pinigus, pridėdamos fluoroforų arba brangių žymėjimo reagentų į didelius antikūnų kiekius, sukurtus prieš tam tikros rūšies imuninius žymenis, o ne žymėdami brangius reagentus antikūnams, sukurtiems prieš antigeną, kurį gali ištirti labai nedaugelis. mokslininkai.