Kas yra antikūnų konjugatas?

Antikūnų konjugatas yra žymėjimo molekulė, kuri gali būti naudojama atliekant histologinius arba fermentinius antigeno aptikimo tyrimus, siekiant lokalizuoti surištus antikūnus. Jis veikia būdamas fiziškai prijungtas arba konjuguotas su antikūnu, kuris naudojamas dominančiam antigenui pažymėti. Antikūnas, pažymėtas antikūnų konjugatu, yra įrankis, dažnai naudojamas atliekant tyrimus, siekiant nustatyti tikslią dominančių baltymų ar antigenų, prieš kuriuos buvo sukurtas antikūnas arba antikūnai, vietą arba kiekį.

Histologiniai ir proteominiai tyrimai dažnai remiasi antikūnais kaip reagentu tyrimų metoduose, kuriais galima žymėti specifinius baltymus. Atskleidžiant dominantį antigeną arba baltymą antikūnui, kuris buvo sukurtas prieš jį, antigenai arba baltymai gali būti pažymėti. Naudojant antikūnų konjugatą, ty antikūną, kuris buvo konjuguotas su specialiai naudojama arba susintetinta molekule, kad būtų lengva aptikti, antikūnai ant atitinkamų antigenų gali būti identifikuoti ir ištirti. Labiausiai paplitęs antikūnų konjugato tipas yra fluorescencinė molekulė, leidžianti fluorescenciniu mikroskopu identifikuoti antigenus audiniuose. Kiti konjugatai apima tokias molekules kaip krienų peroksidazė, kuri naudojama konjugacijoje su antikūnais, kad vėliau būtų sukurta diaminobenzidinu (DAB).

Dažnai pirminiai antikūnai bus gaminami prieš specifinius antigenus, o antriniai antikūnai bus konjuguoti su žymėjimo molekulėmis ir išauginami prieš pirminį antikūną. Pavyzdžiui, gali būti įdomu identifikuoti antigeną, vadinamą Antigenu X. Tada būtų galima naudoti, pavyzdžiui, pelėje išaugintą antikūną, kuris reaguoja ir prilimpa prie antigeno X. Kad būtų galima rasti, kur buvo rasti šie pirminiai pelės antikūnai. ir prijungtas prie šių antigeno X molekulių, tada būtų naudojamas antrinis antikūnas, pavyzdžiui, užaugintas ožkoje, kuris būtų pažymėtas konjugatu, dėl kurio šis antrinis antikūnas būtų aptinkamas atliekant fermentinius arba fluorescencinius mikroskopinius tyrimus. Atliekant antigenų lokalizavimo tyrimus naudojant elektroninį mikroskopą, aukso dalelės dažnai naudojamos kaip antikūnų konjugatas, nes jas galima aptikti naudojant elektronų pluoštą.

Pirminių ir antrinių antikūnų naudojimo priežastis, o ne antikūnų konjugacija, kurioje pirminis antikūnas yra tiesiogiai konjuguotas, yra ekonomiškumas. Antikūnų konjugacija yra brangi laiko ir reagentų atžvilgiu. Ypač neįprastų antigenų atveju, antikūnų konjugacija su pirminiais antikūnais nėra verta gamybos išlaidų. Atvirkščiai, naudojant antikūnų konjugaciją ant antrinių antikūnų, vienu metu galima susintetinti didelius konjuguotų antikūnų kiekius ir naudoti tyrimus su įvairiais pirminiais antikūnais, pritaikytais lokalizuoti daug skirtingų antigenų, todėl gamybos procesas yra naudingas ir ekonomiškas.

Tačiau kai kuriais atvejais pirminis antikūnas bus pažymėtas, kad sumažintų aptikimo signalo triukšmą dėl padidėjusio nespecifinio antikūnų surišimo, atsirandančio dėl kelių antikūnų naudojimo. Nors atliekant šiuos brangius, labai jautrius tyrimus, vis tiek reikės šio metodo. Galima įsigyti rinkinių, leidžiančių tyrėjui pažymėti konjugatus su savo pasirinktu antikūnu, padidinant reagento kainą, tačiau sumažinant protokolo veiksmus ir galbūt padidinant signalo ir triukšmo santykį galutiniame antikūnų aptikimo tyrime.