Kas yra antibiograma?

Antibiogramos testas gali būti naudojamas dviem skirtingais tikslais. Kirby-Bauer metodas naudojamas bakterijų padermės jautrumui įvairiems antibiotikams patikrinti. Antibiogramos taip pat gali nustatyti minimalią slopinančią koncentraciją (MIC) arba mažiausią antibiotiko koncentraciją, kuri slopins bakterijų padermės augimą, naudojant praskiedimo metodą.

Kirby-Bauer metodas yra antibiograma, naudojama nustatyti geriausią antibiotiką, skirtą tam tikrai bakterijų padermei. Bandymai atliekami Petri lėkštelėse, kurios yra seklios, apvalios, uždengtos lėkštelės, užpildytos agaro terpe arba į gelį panašia medžiaga, užpilta maistinėmis medžiagomis, skatinančiomis bakterijų augimą. Tiriamas bakterijų štamas tolygiai paskirstomas ant plokštelės paviršiaus. Keli apskriti popieriniai diskai, kurių kiekvienas yra užpiltas skirtingu antibiotiku, yra tolygiai išdėstyti lėkštelės paviršiuje ir švelniai stumiami žemyn į agarą, kad kontaktuotų su bakterijomis. Tada plokštelėms leidžiama augti per naktį inkubatoriuje.

Po naktinio inkubavimo kiekvieną popierinį diską supa apskritas plotas, kuriame nėra bakterijų augimo. Ši sritis vadinama slopinimo zona. Kiekvieno disko slopinimo zonos skersmuo išmatuojamas ir lyginamas su kontroline lentele, siekiant nustatyti, ar išbandyta bakterijų padermė yra atspari, vidutinė ar jautri kiekvienam iš skirtingų antibiotikų. Didelė slopinimo zona reikštų, kad bakterijos padermė yra jautri bandomojo disko antibiotikams.

Skiedimo metodas yra antibiograma, naudojama siekiant nustatyti efektyviausią antibiotikų koncentraciją, skirtą bakterijų padermei. Pradedama per naktį kultivuojant arba auginant naują bandomosios bakterijos partiją, o paskui tikrinant naujų kultūrų grynumą arba išgryninant kultūrą. Taip pat paruošiamos dvi kontrolinės arba lyginamosios bakterijos. Bakterijos padermės koncentracija nustatoma naudojant spektrofotometrą, o koncentracija sureguliuojama į skiedimo metodui tinkamą diapazoną.

Tirpalų antibiotikų serijinis skiedimas ruošiamas didinant ir laipsniškai keičiant koncentraciją skirtinguose buteliukuose. Viena skirtingų koncentracijų antibiotikų serija pasėjama vienodais kiekiais bandomosios bakterijos padermės, o kitos serijos pasėjamos kontrolinėmis bakterijų padermėmis. Visoms inokuliuotų antibiotikų koncentracijoms leidžiama augti per naktį inkubatoriuje arba tol, kol kai kuriuose buteliukuose pastebimas matomas bakterijų augimas. MIC yra antibiotikų koncentracija, kai nepastebima matomo bakterijų augimo. MIC vertė yra kontroliuojamas būdas įvertinti kintantį bakterijų padermių atsparumą ir nustato infekcijų gydymo antibiotikais ribas.