Kas yra elektroforetinio mobilumo poslinkio tyrimas?

Tyrimas yra bandymas, skirtas atskirti originalias ląstelės dalis į dalis, kurias lengva atpažinti. Elektroforetinio mobilumo poslinkio tyrimas yra eksperimentas, kurio metu makromolekulėms, pavyzdžiui, baltymams, per gelio matricą perkeliama elektra, kad būtų atskirtos skirtingos makromolekulės pagal dydį. Kaip ir automobilio akumuliatoriaus, neigiami ir teigiami galai yra priešingose ​​elektroforetinio mobilumo poslinkio tyrimo arba gelio poslinkio tyrimo pusėse. Dėl to elektra pritraukia makromolekules pagal krūvį. Kiekviena makromolekulė juda skirtingu greičiu, nes mažesnės gelis trikdo mažiau.

Norint nustatyti elektroforetinio mobilumo poslinkio tyrimą, reikia atlikti kelis veiksmus. Pirmiausia reikia paruošti makromolekules, kurias reikia atskirti. Dauguma makromolekulių gaunamos iš gyvų ląstelių ir reikalauja specifinių procedūrų. Norint gauti atskiriamas dalis, dažnai reikia centrifugos ir cheminės reakcijos, kuri suardo ląsteles. Centrifuga suks buteliuką dideliu greičiu ir suformuos reikalingų makromolekulių nuosėdas. Jis ištirpinamas ir dažnai pridedama spalva ar kita etiketė, padedanti sekti gelio poslinkio tyrimą.

Gelis, kartais vadinamas lova, taip pat turi būti šviežiai pagamintas iš tikslaus agarozės miltelių ir vandens mišinio, kuris greitai iš skysčio virsta geliu. Paprastai elektroforetinis mobilumo poslinkio tyrimas turi keletą juostų atskiriems tyrimams, kurie naudojami skirtingiems makromolekulių mišiniams palyginti. Viena juosta visada nustatoma kaip kontrolė ir paprastai turi tik vienos rūšies makromolekulę.

Maitinimo šaltinis turi būti pasirinktas atsargiai ir neprijungtas, kol viskas nėra paruošta. Maitinimo įjungimo laikas lemia makromolekulių mobilumo poslinkį. Norint tinkamai analizuoti, svarbu pakankamai atskirti gabalus. Jei maitinimas nėra tinkamai nustatytas, būsimi palyginimai taip pat bus netikslūs. Makromolekulių kryptis priklausys nuo to, kokį krūvį jos turi natūraliai – dauguma juda neigiamo galo link.

Paprasti genetiniai testai ir baltymų analizė paprastai atliekami naudojant elektroforetinį mobilumo poslinkio tyrimą. Tai rodo skirtingi poslinkiai skirtingose ​​juostose. Jei įvyksta sąveika, makromolekulės susijungia ir lėčiau eina per matricą, palyginti su kontroline juosta, kurioje yra tik viena makromolekulė. Gelio poslinkio tyrimai naudojami siekiant greitai pašalinti arba patvirtinti genetinius rezultatus, kuriems atlikti sudėtingi metodai gali užtrukti ilgiau. Jie taip pat gali nustatyti, ar antikūnai, imuninės sistemos makromolekulė, prilimpa prie baltymų, kurie gali būti naudojami kovojant su bakterijomis ir virusais.