ELISA metodas yra testas, naudojamas imunologijoje ir kitose mokslo srityse, siekiant aptikti antikūnus ir antigenus. ELISA reiškia su fermentais susietą imunosorbentinį tyrimą, kuris reiškia, kad tyrimo rezultatams nustatyti naudojami su fermentais susieti antikūnai. ELISA metodas yra naudojamas medicinoje nustatyti antikūnus prieš ligas kaip diagnostikos priemonę ir yra įprastas metodas, naudojamas imunologiniuose ir biocheminiuose tyrimuose.
ELISA testas buvo sukurtas septintajame ir aštuntajame dešimtmečiuose kaip imunologinių tyrimų, kurių metu buvo naudojami radioaktyvūs antikūnai ir antigenai, pakaitalas. Dėl radioaktyviųjų medžiagų naudojimo rizikos bandymų procesas tapo nesaugus, o ELISA metodo atsiradimas išsprendė abi šias problemas. Užuot naudoję radioaktyviąsias medžiagas tyrimo rezultatams nustatyti, ELISA naudoja fermentus, kurie reaguoja su antikūnais ir sudaro spalvotus produktus. Spalvos atsiradimas ELISA testo metu rodo teigiamą rezultatą.
Yra keletas skirtingų ELISA testų tipų. Dažniausiai naudojamas ELISA metodas vadinamas netiesiogine ELISA; tai antikūnų tyrimas, naudojamas nustatyti, ar mėginyje yra tam tikro tipo antikūnų ir kokia koncentracija. Diagnostinėje medicinoje šis testas naudojamas nustatyti, ar yra antikūnų prieš infekcines ligas, tokias kaip ŽIV, hepatitas ir kt. Antikūnų prieš šias ligas buvimas rodo, kad tiriamas asmuo buvo paveiktas infekcinių ligų sukėlėjų. Paprastai naudojamas paciento kraujo mėginys.
Šiame bandyme specifinis antigeno baltymas naudojamas mikrotitravimo plokštelei padengti. Šioje mažoje, plastikinėje plokštelėje yra 96 mažytės duobutės, o kiekvienoje duobutėje galima atlikti vieną ELISA testą. Tam tikram tyrimui naudojamas antigenas priklauso nuo antikūno tipo, kurį bandoma aptikti. Pavyzdžiui, jei ELISA yra naudojamas ŽIV tyrimui, naudojamas antigenas būtų specifinis šiam virusui.
Atliekant tyrimą, nedidelis nežinomo mėginio kiekis pridedamas prie kiekvienos mikrotitravimo plokštelės šulinėlio ir plokštelė inkubuojama, kad mėginyje esantys antikūnai galėtų prisirišti prie antigeno. Tada į kiekvieną plokštelės šulinėlį pridedamas antrinis aptikimo antikūnas. Jei mėginyje yra bet kurio antikūno tipo, dėl kurio yra tiriamas, vėlesniu inkubaciniu laikotarpiu jis prisijungs prie antrinio aptikimo antikūno.
ELISA metodo esmė yra ta, kad antrinis antikūnas yra paženklintas tam tikros rūšies fermentu. Naudojamas fermentas, reaguodamas su substratu, gali pakeisti tiriamojo mėginio spalvą. Todėl, jei mėginyje yra kurio nors iš tiriamų antikūnų, į šulinėlį įdėjus substrato jo spalva pasikeis dėl antrinio antikūno ir su juo susijusio fermento buvimo.
Yra ir kitų ELISA metodo variantų, įskaitant testą, vadinamą sumuštinių ELISA. Tai naudojama antigenams aptikti mėginyje, o ne antikūnams. Atliekant šį testą, mikrotitravimo plokštelė padengiama standartizuotu antikūnų mėginiu. Tada pridedamas antigeno tiriamasis mėginys, po to pridedamas antrinis aptikimo antikūnas ir su juo susijęs fermentas. Kaip ir netiesioginio ELISA atveju, spalvoto produkto susidarymas rodo teigiamą rezultatą.