Su fermentais susijęs imunosorbentinis tyrimas (ELISA) yra įprastas imunologijoje naudojamas testas antigenams ar antikūnams aptikti. Antigenai sukelia imuninės sistemos reakciją – kitaip tariant, sukelia ligas. ELISA yra naudojama daugeliui bakterijų ir virusų antigenų, įskaitant žmogaus imunodeficito virusą (ŽIV), maliariją, cholerą, tymus ir kiaulytę, aptikti. Šiems ir daugeliui kitų patogenų antikūnams aptikti gali būti naudojamas kiek kitoks ELISA protokolas. ELISA protokolas yra žingsnis po žingsnio procedūra, skirta atlikti specifinį ELISA tyrimą.
Nors ELISA protokolas šiek tiek skiriasi, priklausomai nuo atliekamo ELISA tipo, pagrindinė jų visų koncepcija yra ta pati. ELISA priklauso nuo su fermentais susijusių antikūnų, dar vadinamų antiglobulinais. Signalinė molekulė, prijungta prie šių antiglobulinų, priverčia per tyrimą pridėto substrato spalvą, jei yra norimas antigenas arba antikūnas. Esamo antigeno arba antikūno kiekis yra proporcingas spalvos pasikeitimui, kurį galima išmatuoti elektroniniu plokštelių skaitytuvu.
Yra trys pagrindiniai ELISA tipai. Tiesioginis ELISA tyrimas paprastai naudojamas antigenams, o ne antikūnams aptikti. Tai paprasčiausias ELISA protokolas, nes su fermentu susijęs antikūnas tiesiogiai jungiasi prie norimo antigeno. Tada pridedamas substratas, siekiant nustatyti esamo antigeno kiekį.
Antikūnams aptikti naudojama netiesioginė ELISA, o antigenams aptikti gali būti naudojama kito tipo netiesioginė ELISA, vadinama sumuštinių ELISA. Sumuštinis ELISA protokolas reikalauja dviejų antikūnų, vadinamų fiksavimo ir aptikimo antikūnais, kurie prisijungtų prie norimo antigeno. Pridedamas antiglobulinas, kuris prisijungia prie aptikimo antikūno, ir pridedamas substratas. Netiesioginė ELISA atliekama pagal panašų protokolą, tačiau norint aptikti pageidaujamą antikūną, naudojamas gaudymo antigenas, o ne gaudantis antikūnas.
Konkurencinga ELISA dažnai naudojama mažų koncentracijų antigenams aptikti, nes tai labai jautrus tyrimas. Priešingai nei kiti ELISA protokolai, konkurencinėje ELISA vietoje antikūnas naudojamas su fermentu susietas antigenas ir šiek tiek kitoks kiekybinio nustatymo metodas. Jame mėginys, kuriame yra aptiktinas antigenas, ir su fermentu susietas antigenas pridedami prie antikūno, o du antigenai konkuruoja dėl antikūnų surišimo vietų. Pridėjus substrato, spalvos pokytis yra didesnis, o surištų su fermentu susijusių antigenų ir surištų mėginio antigenų santykis yra didesnis. Tai reiškia, kad esant mažesnei mėginio antigeno koncentracijai, aptinkamas didesnis spalvos pokytis, todėl šis metodas yra toks jautrus.