Fluoresceino izotiocianatu konjuguotas (FITC) antikūnas yra fluorescencinis molekulinis žymuo, labai specifinis tam tikram baltymui arba pirminiam antikūnui. Jie naudojami baltymams identifikuoti atliekant imunocitochemiją, fermentų ir baltymų aktyvumo tyrimus, srauto citometriją ir Western blotting. Daugumą FITC antikūnų galima įsigyti iš specializuotų molekulinės biologijos įmonių arba pagaminti atskirose tyrimų laboratorijose.
FITC yra fluorochromas, dažnai konjuguotas arba sujungtas su antikūnu, kad būtų sukurtas specifinis fluorescencinis žymeklis. Kai tam tikro bangos ilgio elektromagnetinė energija veikia, fluorochromai yra cheminės medžiagos, kurios sugers energiją ir išskirs tam tikro bangos ilgio fotoną. FITC sugeria energiją esant 495 nm ir skleidžia fotoną esant 521 nm. Kiekvienas fluorochromas turi skirtingą absorbcijos ir emisijos diapazoną, todėl viename audinio gabale ar mėginyje galima sistemingai aptikti daug su fluorchromu susijusių antikūnų. Tai panašu į skirtingų ląstelės dalių žymėjimą skirtingomis spalvomis ir specialių akinių naudojimą, kad vienu metu būtų galima žiūrėti tik į vieną spalvą.
Antikūnai gali būti susieti arba konjuguoti su FITC molekule, kad susidarytų FITC antikūnas. Šis FITC antikūnas gali būti naudojamas tiesiogiai arba netiesiogiai pažymėti baltymą. Kai FITC antikūnas tiesiogiai žymi baltymą, jis veikia kaip pirminis antikūnas arba antikūnas, tiesiogiai kontaktuojantis su antigenu. FITC antikūnas naudojamas netiesiogiai, kai jis naudojamas kaip antrinis antikūnas, specifiškai jungiantis prie pirminio antikūno. Kai FITC konjuguotas antikūnas naudojamas tiesiogiai, ženklinimo procedūra trunka trumpiau, tačiau žymėjimas nėra toks stiprus. Netiesioginis žymėjimas yra papildomas žingsnis, tačiau signalas arba etiketė sustiprinami, nes keli FITC pažymėti antriniai antikūnai gali prisijungti prie vieno pirminio antikūno.
Yra daug FITC antikūnų panaudojimo ląstelių ir molekulinėje biologijoje. Šio tipo antikūnai gali būti naudojami atskirai arba kartu su kitais monokloniniais arba polikloniniais antikūnais specifiniams baltymams žymėti ląstelėse taikant metodą, žinomą kaip imunocitochemija. FITC antikūnai taip pat gali būti naudojami atliekant tokius metodus kaip fermentų ir baltymų aktyvumo tyrimai, srauto citometrija ir Western blotting.
FITC konjuguoti pirminiai ir antriniai antikūnai yra plačiai prieinami daugelyje molekulinės biologijos įmonių. Laboratorijos taip pat gali paruošti savo pirminius antikūnus ir naudoti rinkinį FITC konjuguoti su jais. Kai kurios įmonės paims laboratorijoje paruoštus pirminius antikūnus ir konjuguos juos su FITC fluorochromu laboratorijai. FITC konjuguotų antrinių antikūnų paprastai negamina atskiros tyrimų laboratorijos, jie paprastai perkami iš įmonių, kurios specializuojasi antrinių antikūnų gamyboje.