Higromicinas B yra antibiotikas, naudojamas rekombinantiniam klonavimui, siekiant atrinkti ląsteles, kurios buvo transformuotos norima DNR seka. Jis slopina baltymų sintezę, naikindamas netransformuotas, jautrias ląsteles. Šis junginys gali būti naudojamas bakterijų, grybelių, augalų ir žinduolių ląstelių kultūrose. Higromicinas B, kurį gamina dirvoje gyvenantis aktinomicetas Streptomyces hygroscopicus, taip pat dedamas į vištų ir kiaulių pašarus, kad jų neužkrėstų parazitai, pavyzdžiui, kirminai.
Aktinomicetai yra tam tikros rūšies bakterijos, kurios yra įprasti dirvožemio gyventojai. Jie gamina įvairius natūralius produktus, kurie yra toksiški kitiems organizmams, kad padėtų jiems konkuruoti ir išgyventi dirvožemyje. Iš šių organizmų buvo išskirta daug įvairių tipų antibiotikų, įskaitant streptomiciną ir aktinomiciną. Higromicinas B buvo atrastas 1953 m. Nors jis buvo toksiškas žmonėms, jo pirmasis panaudojimas buvo naminių paukščių ir kiaulių ėdalo papildymas, siekiant užkirsti kelią kirminų užkrėtimui.
Higromicinas B yra aminoglikozidų grupės antibiotikų pavyzdys. Jį sudaro cukrūs, kuriuose yra amino grupių. Nustatyta, kad šiam antibiotikui atsparios kelios skirtingos bakterijos. Šis atsparumas suaktyvinamas antibiotiko molekulėje fosfato grupei perkeliant į hidroksilo-OH grupę. Baltymas, kuris vykdo šią reakciją, yra žinomas kaip higromicino B fosfotransferazė (Hph).
Higromicino B veikimo mechanizmas yra slopinti baltymų sintezę, veikiant pasiuntinio RNR (mRNR) transliaciją. Baltymai sudaryti iš ilgų aminorūgščių grandinių. Paprastai ribosomos juda išilgai mRNR grandinės ir sudaro aminorūgštį pagal trijų mRNR bazių grupę, žinomą kaip kodonas. Kai yra antibiotiko, ribosomos netinkamai nuskaito kodoną ir neteisingai verčia. Paprastai dėl to nutrūksta baltymų sintezė.
Atsiradus rekombinantinei DNR technologijai, mokslininkams pavyko klonuoti Hph genus iš kelių skirtingų bakterijų tipų. Vieno tipo genas buvo rastas antibiotiką gaminančiame aktinomicete, kitas – gramneigiamoje bakterijoje Escherichia coli (E. coli) ir Klebsiella pneumoniae. Kadangi E. coli taip dažnai manipuliuojama genų inžinerijoje, jos genas yra dažniausiai naudojamas eksperimentams. Šio antibiotiko veikimo būdas skiriasi nuo daugelio kitų, todėl jį dažnai galima naudoti kartu su papildomo tipo antibiotikais.
Šis atsparumo higromicinui B genas yra plačiai naudojamas kaip pasirenkamas žymeklis klonavimo eksperimentų metu. Taigi, jis naudojamas rekombinantinėje plazmidėje, kurioje taip pat yra genas, kurį mokslininkai nori įvesti į organizmą, pavyzdžiui, grybą ar augalų ląstelių liniją. Tik kelios ląstelės dideliame ląstelių mišinyje paprastai turės norimą plazmidę. Kai į ląstelių mišinį pridedamas antibiotikas, jis sunaikins jautrias ląsteles, kurios nepasisavino rekombinantinės plazmidės. Ši higromicino B atranka užtikrina, kad likusiose ląstelėse ir toliau bus dominantis genas.