Kas yra kiekybinė fluorescencija?

Kiekybinė fluorescencija yra bandinio skleidžiamos spinduliuotės rodymas. Naudodamas vaizdo gavimo technologiją, mokslininkas gali rinkti informaciją apie pavyzdį ir naudoti ją, kad sužinotų daugiau apie jo struktūrą ar funkciją. Šis metodas dažniausiai naudojamas biologijoje tiriant atskiras ląsteles ir ištisus organizmus. Tam reikia patekti į laboratoriją, kurioje yra mikroskopijos įranga ir tinkamo jautrumo kameros. Šios analizės formos vaizdų pavyzdžius galima pamatyti vadovėliuose ir moksliniuose straipsniuose, taip pat aptariant gautus duomenis.

Mėginiai, paruošti vaizdavimui mikroskopu, gali būti nudažyti fluorescencinėmis žymėmis, pavyzdžiui, baltymais, kurie prisitvirtina prie specifinių ląstelės struktūrų. Kai šios žymos tinkamomis sąlygomis žiūrimos per fotoaparatą, jos užsidega. Paprasčiausias apšvietimo stebėjimas gali suteikti tyrėjui svarbios informacijos. Pavyzdžiui, imunologas, ieškantis konkretaus antikūno pėdsakų, gali jį identifikuoti naudoti žymą. Tai kokybinės fluorescencijos pavyzdys, kai apšvietimas suteikia bendros informacijos apie bandinio savybes.

Matuodamas kiekybinę fluorescenciją, tyrėjas renka specifinę, išmatuojamą informaciją. Tai gali apimti duomenis apie tikslų šviesos intensyvumą. Tolesnis mėginio apdorojimas gali suteikti galimybių naudoti pažangius vaizdo gavimo metodus, tokius kaip fluorescencinis atkūrimas po fotobalinimo (FRAP), kuris suteikia informacijos apie struktūrų judėjimą mėginių viduje. Visi šie kiekybiniai fluorescencijos metodai gali suteikti naujų įžvalgų apie tai, kas yra struktūra, kaip ji veikia ir kas joje yra.

Tokiam darbui reikalinga tiksli įranga. Bet koks fluorescencinis apdorojimas, pridėtas prie mėginio, turi būti kruopščiai paruoštas, kad jie žymėtų norimas struktūras ir nieko daugiau. Įranga turi būti tinkamai jautri ir sukalibruota, kad įsitikintų, jog ji renka tikslią informaciją. Pavyzdžiui, jei skaitmeninio fotoaparato detektorius išjungtas, kai kuriose mėginio dalyse gali nepavykti surinkti fluorescencijos arba gauti klaidingą rodmenį. Abiem atvejais duomenys būtų neteisingi.

Patologijos laboratorijos kai kuriems mėginiams įvertinti gali naudoti kiekybinę fluorescenciją. Ši technika taip pat plačiai naudojama tyrimuose. Kai kurie labai įspūdingi vaizdai gali būti sukurti naudojant fluorescencines žymes, kad būtų atskirtos tokios struktūros kaip nervai ar specifiniai baltymai. Be to, kad vaizdai yra vizualiai nuostabūs, juose gali būti daug informacijos tyrinėtojams, galintiems juos perskaityti. Galima analizuoti kiekybinius fluorescencinius vaizdus naudojant pažangias kompiuterines programas, kad būtų galima išgauti daugiau duomenų ir gauti reikšmingų rezultatų.