Kas yra Western Blot?

Western blot yra laboratorinės analizės metodas, naudojamas baltymams izoliuoti. Jis gali būti naudojamas diagnozuojant tam tikras ligas, taip pat tiriant įvairius baltymus ir procesus. Žinoma, Western blot yra susijęs su ŽIV infekcijos diagnoze, tačiau jis taip pat gali būti naudojamas ieškant galvijų spongiforminio encefalito (GSE) ir Laimo ligos pėdsakų. Mėginiai, išsiųsti tirti pagal Western blot protokolą, gali gauti rezultatus per kelias dienas ar kelias savaites, priklausomai nuo laboratorijos pajėgumų ir skubos.

Atliekant Western blot mėginį, kuris gali būti iš kraujo arba audinių, pirmiausia atliekama elektroforezė, kad baltymai išsiskirtų pagal ilgį. Elektroforezės gelio juostelė su izoliuotais tikslinio ilgio baltymais gali būti naudojama baltymams perkelti į nitroceliuliozės substratą kitam tyrimo etapui. Šio etapo metu į mėginį įvedamas antikūnas, kurio tikslas – pažymėti baltymus antigenais, prie kurių tas antikūnas užsifiksuoja.

Kai baltymai yra pažymėti, juos galima lengvai atpažinti. Atliekant tyrimą dėl ligos, reaktyvaus baltymo buvimas rodo, kad mėginio testas buvo teigiamas. „Western blot“ retai grąžina klaidingus teigiamus rezultatus, nors kartais tai gali įvykti, taip pat gali pateikti klaidingus neigiamus rezultatus, kai asmuo iš tikrųjų serga liga, tačiau tai neparodo „Western blot“ testu. Tai gali būti ypač dažna tais atvejais, kai ligos sukėlėjas dar nepradėjo daugintis.

Mokslininkai gali naudoti rezultatus, kad nustatytų konkrečius baltymus, kuriuos jie seka, ir įvairiems kitiems tikslams. Supratimas, kaip veikia Western blot protokolas, yra svarbus kai kurių mokslininkų ir laboratorijos technikų įgūdis, nes naudojant šį metodą jie turi sugebėti pateikti patikimus ir patikimus rezultatus. Laboratoriniai įgūdžiai, įskaitant mokymąsi tvarkyti sudėtingus ar blogus mėginius ir išvengti užteršimo proceso metu, kad būtų žinomi tyrimo rezultatai.

Šis metodas kartais žinomas kaip imunoblotas, nes iš esmės norimi baltymai yra „ištrinami“ antikūnais, kad jie atsirastų. Šis tyrimas gali būti naudojamas visų gyvūnų, ne tik žmonių, baltymų paieškai, o veterinarijos gydytojai dažnai taiko Western blot testą, kad nustatytų, ar karvių banda buvo užsikrėtusi arba paveikta GSE.